Roztwór barwiący Hoechst 33342

Hoechst 33342 (bisBenzimide H 33342, HOE 33342), wzór cząsteczkowy to C₂₇H₂₈N₆O·3HCl, masa cząsteczkowa wynosi 561,93, numer CAS to 23491-52-3. Jest to niebieski barwnik fluorescencyjny, który może przenikać przez błonę komórkową i barwić DNA w jądrze komórkowym. Barwnik ten ma słabą fluorescencję w roztworze, ale fluorescencja staje się jaśniejsza w połączeniu z małym rowkiem DNA w obszarze wzbogaconym w AT, dlatego stosuje się go do zwykłego barwienia jądrowego lub konwencjonalnego barwienia DNA.

Ten produkt jest dostarczany w postaci roztworu o stężeniu 1 mg/ml Hoechst 33342. W przypadku stosowania do barwienia zwykle stężenie robocze wynosi 0.5-10 ug/ml. Hoechst 33342 ma maksymalną długość fali wzbudzenia 346 nm i maksymalną długość fali emisji 460 nm; Po połączeniu z dwuniciowym DNA maksymalna długość fali wzbudzenia wynosi 350 nm, a maksymalna długość fali emisji wynosi 461 nm. Można go stosować do znakowania jądra komórek lub tkanek w ustalonych lub nieustalonych warunkach i można go wykryć za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego, cytometru przepływowego i innych instrumentów.

Wysyłaj z mokrym lodem; przechowuj w temperaturze -20 stopnia od światła, ważny przez 12 miesięcy.

1. Roztwór barwiący Hoechst 33342 (1 mg/ml)został rozcieńczony do0.5-10 ug/mL Hoechst 33342 barwienierozwiązaniez PBS lub innym odpowiednim buforem;

2. W przypadku utrwalonych próbek komórek i tkanek:

A. W przypadku utrwalonych komórek lub próbek tkanek po utrwaleniu usuń utrwalacz i przemyj 2-3 razy PBS lub innym odpowiednim buforem, za każdym razem3-5 min (w przypadku wykrycia komórek w zawiesinie należy postępować zgodnie z rutynową obsługą kuwet w zawiesinie, i dodać etapy takie jak wirowanie dla wszystkich eksperymentów);

B. (nieobowiązkowo) Jeżeli utrwalone komórki lub tkanki muszą zostać poddane obróbce w celu barwienia immunofluorescencyjnego itp., priorytetowe znaczenie ma odpowiednie przetwarzanie, a barwienie Hoechst 33342 przeprowadza się po przetworzeniu;

C. Nabrać odpowiednią ilość roboczego roztworu barwiącego Hoechst 33342 w celu wybarwienia utrwalonych komórek lub tkanek, przykryć próbkę i inkubować w temperaturze pokojowej przez około 5 minut;

D. Po usunięciu roboczego roztworu barwiącego Hoechst 33342, przemyć PBS lub innym odpowiednim buforem 2-3 razy przez 3-5 min za każdym razem;

mi. Uszczelnij lub obserwuj bezpośrednio pod mikroskopem fluorescencyjnym, Ex/Em: 350 nm/460 nm.

3. W przypadku żywych komórek lub hodowanych tkanek:

A. Dodać odpowiednią ilość roboczego roztworu barwiącego Hoechst 33342 do próbki przeznaczonej do barwienia. Próbka musi być całkowicie pokryta. Inkubować w inkubatorze w temperaturze 37 stopni przez 10-20 min. Zazwyczaj 1 ml roztworu barwiącego dodaje się do jednego dołka płytki sześciodołkowej. Do jednego dołka płytki z sześcioma dołkami należy dodać 100 µl roztworu barwiącego;

B. Usunąć roztwór barwiący, przemyć 2-3 razy PBS lub innym odpowiednim buforem, za każdym razem 3-5 min;

C. Obserwuj bezpośrednio pod mikroskopem fluorescencyjnym, Ex/Em: 350 nm/460 nm.

1. Stężenie i czas inkubacji roztworu roboczego do barwienia Hoechst 33342 można dostosować do aktualnej sytuacji.

2. Barwniki fluorescencyjne mają problemy z gaszeniem, staraj się zakończyć wykrywanie tego samego dnia po barwieniu; stosować tabletki montażowe wygaszające fluorescencję (polecam Servicebio G1401), aby spowolnić wygaszanie fluorescencji.

3. Dla własnego zdrowia i bezpieczeństwa podczas pracy należy nosić fartuchy laboratoryjne i rękawiczki.

Tylko do użytku badawczego!

Popularne Tagi: hoechst 33342 roztwór barwiący, Chiny hoechst 33342 roztwór barwiący producenci, dostawcy, fabryka